在液相色譜分析中，不同型號(hào)儀器間色譜行為存在差異是普遍存在的現(xiàn)象。而造成同樣色譜條件在不同型號(hào)色譜儀器上存在色譜行為差異的諸多原因中，色譜系統(tǒng)延遲體積差異無(wú)疑是造成結(jié)果差異的主要原因之一。

可以看到，由于四元低壓梯度模式其梯度混合點(diǎn)在比例閥并早于泵頭，因此整個(gè)泵頭的體積都將造成梯度延遲。而二元高壓混合由于混合點(diǎn)在泵后的混合器部分，因此泵頭體積將不會(huì)影響梯度延遲。這就是我們通常認(rèn)為二元高壓的系統(tǒng)體積小，在極端梯度條件下性能更好更穩(wěn)定這一“色譜常識(shí)”的底層技術(shù)原因。

那么系統(tǒng)（梯度延遲）體積的不同，會(huì)如何影響色譜行為呢？在色譜圖上的直觀變化是什么呢？

上圖是相同的咖啡因標(biāo)準(zhǔn)樣品在不同色譜儀上的色譜圖，可以看到同樣色譜方法下，咖啡因出峰時(shí)間相差0.8min左右。經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單計(jì)算可以判斷，保留時(shí)間的差別主要是由兩個(gè)系統(tǒng)間系統(tǒng)延遲體積相差約750ul帶來(lái)的。

保留時(shí)間如此明顯的變化為不同儀器間的方法遷移帶來(lái)了挑戰(zhàn)。通常情況下，為了在不同系統(tǒng)間轉(zhuǎn)移方法時(shí)獲取可比較的色譜圖，我們需要對(duì)梯度方法進(jìn)行調(diào)整以確保保留時(shí)間的一致、可比。而方法的變化一般會(huì)帶來(lái)方法重新驗(yàn)證等一系列的后續(xù)工作，使得色譜方法遷移過(guò)程變成一個(gè)“昂貴的問(wèn)題”。

為了更方便高效地解決類(lèi)似問(wèn)題，華譜科儀開(kāi)發(fā)了梯度起點(diǎn)調(diào)整功能。從此客戶只需粗略了解色譜儀器的系統(tǒng)體積差，通過(guò)計(jì)算換算成梯度起點(diǎn)調(diào)整的秒數(shù)，即可方便的將方法遷移后的色譜行為（保留時(shí)間）調(diào)整到遷移前的類(lèi)似水平。

以下是一個(gè)實(shí)際案例：

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩⒃?/span>Alliance儀器上開(kāi)發(fā)的色譜方法遷移到華譜科儀S6000 HPLC上

樣    品：紅參中皂苷

色 譜 柱：Alphasil ES-C18, 4.6×150 mm, 3.5 μm

柱    溫：30 ℃

流    速：1.0 mL/min

進(jìn) 樣 量：10 μL

檢測(cè)波長(zhǎng)：203 nm

下載梯度起點(diǎn)調(diào)整說(shuō)明